Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями




Скачать 316.46 Kb.
НазваниеМукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями
страница1/3
Дата публикации22.06.2013
Размер316.46 Kb.
ТипАвтореферат
www.lit-yaz.ru > Химия > Автореферат
  1   2   3


На правах рукописи

ПОЛИЩУК ВАЛЕНТИНА БОРИСОВНА

Мукозальный иммунитет

и биоценоз слизистой ротовой полости

у детей с солидными новообразованиями

14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология

14.01.12- онкология
АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва, 2012

Работа выполнена в ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН и в Научно-исследовательском институте детской онкологии и гематологии ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН
^ Научные руководители: заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, профессор

Костинов Михаил Петрович
доктор медицинских наук

Моисеенко Евгения Ивановна


^ Официальные оппоненты:

Маякова Светлана Александровна, доктор медицинских наук, профессор, НИИ детской онкологии и гематологии ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН, ведущий научный сотрудник отделения химиотерапии гемобластозов

^ Ляшенко Всеволод Андреевич, доктор медицинских наук, профессор, ФГБУ «НИИВС им. И.И. Мечникова» РАМН, главный специалист лаборатории иммунологии детских вирусных инфекций

^ Ведущая организация: ФГБУ «Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздравсоцразвития России
Защита диссертации состоится « 18 » октября 2012 г. в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 001.035.01 в ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН по адресу г. Москва, Малый Казенный пер., д. 5а.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН.

Автореферат разослан «___» _________ 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

кандидат биологических наук И.В. Яковлева

^ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Инфекционные осложнения химиотерапии являются одной из основных причин возникновения жизнеугрожающих состояний у онкологических больных (Н.В. Дмитриева, 2003, Girmenia, 2011). При этом входными воротами инфекции часто являются слизистые оболочки ротовой полости, а возбудителями - даже представители нормальной микрофлоры кожи и слизистых. Стоматиты, являясь наиболее частыми проявлениями инфекции на фоне противоопухолевой терапии, в зависимости от ее интенсивности развиваются у 30-100% пациентов и могут влиять на прогноз заболевания (L.S. Elting, 2003, S.N. O'Brien, 2003, S.L Goldberg, 2004, M.U. Naidu, 2004). При развитии стоматита на фоне нейтропении риск бактериемии увеличивается в 4 раза (J.L. Pico, 1998, М. Глаузер, 2001).

Причиной тяжелых мукозитов является смешанная инфекция. В настоящее время преобладает грамположительная флора, частота выявления которой составляет 60%-70%; на долю грамотрицательных бактерий проходится 31%-33% выделяемых микроорганизмов (Г.А. Клясова, 2000), а также отмечается рост числа стоматитов, обусловленных Candida albicans (И.Н. Петухова, 2003). Следовательно, изучение особенностей биоценоза ротовой полости у онкологических больных даст возможность выделить основных возбудителей стоматитов на современном этапе.

Местно синтезированные IgA антитела являются важным фактором противомикробного иммунитета, а низкий уровень sIgA может быть причиной пониженной устойчивости к разнообразным микроорганизмам. При этом, данные о состоянии мукозального иммунитета и его изменениях на фоне проведения химиотерапии практически отсутствуют.

Многочисленные подходы к лечению и профилактике стоматитов у онкологических пациентов не приводят к достижению желаемого результата. Представляется перспективным использование топических бактериальных лизатов у данного контингента больных, с учетом доказанной эффективности их применения при различных заболеваниях ротовой полости (С.В. Сулоева, 2005, О.Н. Волкова, 2007). Действие этих препаратов направлено на повышение образования IgA, секреции sIgA, уровня лизоцима, фагоцитарной активности, синтеза интерферона. Кроме того, при их применении было отмечено усиление саливации и снижение вязкости слюны (А.В. Шумский, 2000). Возможно, взаимодействие всех этих факторов создает оптимальные условия для регенерации слизистой оболочки полости рта у больных с онкологическими заболеваниями, что в целом улучшает прогноз благополучного исхода лечения.

С учетом вышеизложенного возникает необходимость комплексной иммунологической и микробиологической оценки состояния слизистой оболочки ротовой полости и изучения возможности использования топических бактериальных лизатов с целью профилактики и лечения мукозитов.

Цель исследования – изучение показателей мукозального, гуморального иммунитета и биоценоза слизистой ротовой полости для выработки тактики применения топического бактериального лизата в профилактике и лечении стоматитов при противоопухолевой терапии у детей с солидными новообразованиями.

^ Задачи исследования:

1. Определить содержание IgA, sIgA, IgG в слюне у больных с солидными новообразованиями до лечения и в процессе противоопухолевой терапии.

2. Охарактеризовать уровни сывороточных IgА, IgМ, IgG у детей с солидными новообразованиями до и в процессе противоопухолевой терапии.

3. Исследовать микробиоценоз ротовой полости у наблюдаемых групп детей.

4. Оценить частоту развития и клиническое течение стоматитов у детей с солидными новообразованиями в процессе противоопухолевой терапии.

5. Изучить влияние топического бактериального лизата на состояние мукозального иммунитета, биоценоза слизистой ротовой полости и течение стоматитов у детей с солидными новообразованиями.

^ Научная новизна

Впервые дана оценка содержания IgA, sIgA, IgG в слюне детей со злокачественными новообразованиями. Установлено, что 66,7% больных имеют нарушения по одному или двум показателям. Наибольшие отклонения уровней секреторных иммуноглобулинов были выявлены среди детей с локализацией новообразования в области головы и шеи.

Впервые выявлены особенности биоценоза слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями, характеризующиеся низким содержанием оральных стрептококков группы viridans и преобладанием в нем пиогенных стрептококков и представителей группы milleri.

Впервые показано, что применение топического бактериального лизата у детей с солидными новообразованиями в процессе противоопухолевой терапии способствует сохранению нормального уровня IgG в слюне, количественным перестановкам внутри микробных сообществ без сокращения числа ассоциантов и снижению тяжести течения стоматитов.

^ Практическая значимость работы

Показана актуальность включения оценки показателей мукозального иммунитета и биоценоза слизистой ротовой полости в план обследования детей с солидными новообразованиями до и в процессе полихимиотерапии с назначением топического бактериального лизата для профилактики и лечения стоматитов.

^ Положения, выносимые на защиту

  1. На этапе первичной диагностики заболевания у большинства детей с солидными новообразованиями имеются нарушения мукозального иммунитета, наиболее выраженные при локализации опухоли в области головы и шеи.

  2. При проведении полихимиотерапии у детей с солидными новообразованиями наблюдается изменение баланса микробных ассоциантов, населяющих данный биотоп, нарушается межмикробный антагонизм, играющий важную роль в естественной резистентности макроорганизма к инфекции.

  3. Проведение полихимиотерапии одновременно с назначением топического бактериального лизата способствует снижению тяжести течения стоматитов.

^ Апробация материалов диссертации и публикаци

Основные положения и результаты работы доложены и обсуждены на Конгрессах «Человек и лекарство» (Москва, 2004, 2006, 2011), научных конференциях ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН (Москва, 2012) и Научно-исследовательского института детской онкологии и гематологии ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» РАМН (Москва,2012).

По материалам диссертации опубликованы 5 печатных работ, из них 3 - в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

^ Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследования, четырех глав собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций, приложения, списка используемой литературы. Диссертация изложена на 118 страницах, иллюстрирована 36 таблицами, 3 рисунками. Список литературы содержит 158 источников (45 отечественных и 113 зарубежных).

^ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы

исследования

Исследование проводилось в ФГБУ «НИИВС им. И.И. Мечникова» РАМН и в НИИ детской онкологии и гематологии ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН.

На базе отделения амбулаторной диагностики и лечения НИИ детской онкологии и гематологии ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН у 55 включенных в исследование детей в возрасте от 6 мес. до 17 лет, на основании данных полного клинико-морфологического обследования были диагностированы различные злокачественные новообразования. У наблюдаемых больных имели место следующие нозологические формы: саркома Юинга и примитивная нейроэктодермальная опухоль (ПНЭО) выявлены у 20 (36,3%) детей, остеогенная саркома – у 10 (18,2%), рабдомиосаркома – у 6 (10,9%), нефробластома – у 5 (9,1%), синовиальная саркома – у 5 (9,1%), герминогенная опухоль – у 4 (7,3%), рак носоглотки – 4 (7,3%) и еще у одного пациента (1,8%) был рак печени.

Для решения поставленных в исследовании задач все пациенты были распределены в 2 группы, сопоставимые по полу и возрасту. В I группу были включены 22 ребенка с солидными новообразованиями, которым наряду со специальным противоопухолевым лечением назначали топический бактериальный лизат Имудон по 6 таблеток в сутки в течение 20 дней. Во II группу (сравнения) вошли 33 ребенка с аналогичной патологией получавших только полихимиотерапию (ПХТ). Противоопухолевое лечение проводилось по принятым в НИИ детской онкологии и гематологии ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН научным протоколам. Оценку тяжести стоматитов проводили 3 раза в неделю по шкале ВОЗ.

В исследовании применяли препарат Имудон, представляющий собой поливалентный антигенный комплекс, состав которого соответствует возбудителям, наиболее часто вызывающим воспалительные процессы в полости рта. Активным действующим компонентом препарата является смесь лизатов бактерий: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus lactis; Streptococcus pyogenes, Streptococcus sanguis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumoniae, Corynebacterium pseudodiphtheriticum, Fusiformis fusiformis, Candida albicans. Препарат обладает исключительно топическим действием.

Методики определения гуморальных факторов иммунитета

  1. Концентрацию иммуноглобулинов классов G, A и секреторного IgА в слюне определяли методом радиальной иммунодиффузии (РИД) с использованием коммерческого набора (НПЦ «Медицинская иммунология») в соответствии с прилагаемой инструкцией.

  2. Уровень сывороточных иммуноглобулинов классов A, G и М определяли методом РИД в геле по G. Manchini с использованием коммерческого набора (НПЦ «Медицинская иммунология») в соответствии с прилагаемой инструкцией.

^ Микробиологическое исследование микрофлоры ротовой полости

В работе использовали классический микробиологический метод лабораторной диагностики (приказ МЗ СССР №535 от 22 апреля 1985, действующий по настоящее время).

Для характеристики частоты встречаемости отдельных видов и биоценоза в целом использовался показатель постоянства С (Э.Е. Романенко, 2003).

^ Методы статистической обработки

Статистическая обработка данных проводилась с использованием статистических пакетов «Microsoft Excel 2006 for Windows XP, непараметрических критериев статистической значимости различий двух выборок, общепринятыми методами статистической обработки данных.
^ Результаты собственных исследований и их обсуждение

Характеристика мукозального иммунитета у детей с солидными новообразованиями
Состояние мукозального иммунитета (IgA, IgG и sIgA) в слюне на этапе первичной диагностики заболевания было изучено у 42 пациентов с солидными новообразованиями. Исходно только у 14 (33,3%) детей все исследуемые параметры были в пределах нормы (IgA 30-160 мкг/мл, sIgA 70-250 мкг/мл, IgG 0-50 мкг/мл). Снижение или повышение значений одного из показателей отмечено у 15 (35,7%) пациентов, 2-х – у 13 (31,0%) детей. При локализации новообразования в области головы и шеи отклонения хотя бы одного из исследуемых параметров были отмечены у всех 6 детей. Не выявлено отличий в уровнях исследуемых показателей при различных нозологических формах.

Уровни IgA и IgG в слюне у большинства (73,8% и 83,3%, соответственно) пациентов регистрировались в пределах нормы (рис. 1). Наибольшие отклонения были характерны для sIgA, нормальные значения которого отмечены только у 19 (45,2%) детей.



Рис. 1. Распределение пациентов c солидными новообразованиями в соответствии с исходными уровнями IgA, sIgA и IgG в слюне

У детей с локализацией новообразования в области головы и шеи отмечалась тенденция к увеличению уровня IgG в слюне по сравнению с

группой больных с другими локализациями опухолевого процесса (p> 0,05). Выявленные различия могут быть обусловлены напряжением местного иммунитета вследствие локализации образования. Вероятно, что при проведении ПХТ лучевой терапии пациенты с локализацией новообразования в области головы и шеи имеют высокий риск развития инфекционных осложнений.

Динамическое исследование уровней иммуноглобулинов слюны в процессе ПХТ проведено у 36 пациентов, при этом 20 детей составили группу исследования, а 16 – группу сравнения.

В группе детей, получавших на фоне ПХТ препарат Имудон, среднее значение IgG в слюне на протяжении 3 месяцев варьировало в пределах нормальных значений, тогда как в группе сравнения к 3 месяцам наблюдения отмечено его резкое нарастание, значительно превышающее нормальный

уровень, что, вероятно, может отражать наличие воспалительного процесса в ротоглотке детей II группы (рис. 2).

*


N < 50 50

*

*


Рис. 2. Динамика уровня IgG в слюне пациентов с солидными новообразованиями в процессе ПХТ

Примечание: * p < 0,05 различие по отношению к исходному уровню

p < 0,05 различие между группами

Средние значения IgA в слюне пациентов обеих групп в процессе проведения ПХТ существенно не изменились.

Нами был проведен анализ динамики содержания саливарного IgA в зависимости от исходных значений. У 5 (25%) детей I группы с изначально низким уровнем IgA в слюне спустя 5-10 дней от начала приема Имудона отмечена его нормальная концентрация, регистрировавшаяся на протяжении всего периода исследования, хотя через 3 месяца средний уровень IgA имел тенденцию к снижению (табл. 1). У 15 (75%) пациентов с исходно нормальным

Таблица 1

Динамика уровня IgA в слюне пациентов с солидными новообразованиями

в зависимости от исходных значений

Группы

наблю

дения

Исходные уровни IgA по отношению к N (30-160 мкг/мл)

Уровни IgA (мкг/мл) в установленные сроки исследования

Исходное значение

Через

5-10 дней

Через

1мес.

Через

3 мес.

I

Низкие

(n=5)

0,1

105,9±42,4***

86,3±33,8***

42,8±18,04***

нормальные (n=15)

75,3±6,7

103,7±21,6

90,7±12,7

56,7±17,6

II

нормальные (n=11)

94,4±7,9

87,1±12,2

96,5±11,7

93,4±17,6

высокие

(n=5)

229±32,2

61,3±36,5*

77,3±28,5*

44,9±23,6*

Примечание: N- норма

*** p < 0,001 различие по отношению к исходному уровню

* p < 0,05 различие по отношению к исходному уровню

значением саливарного IgA не выявлено его изменений. Высокий уровень IgA в слюне в этой группе не зарегистрирован. Во II группе исходно нормальный уровень IgA в слюне был отмечен у 11 (68,8%) детей. При динамическом наблюдении в процессе ПХТ данный показатель не изменялся. У 5 (31,2%) пациентов группы сравнения с исходно высоким содержанием IgA в слюне на 5-10-й день химиотерапии было выявлено его снижение, сохранявшееся в течение 3 месяцев наблюдения.

В группе детей, получавших Имудон, на 5-10 день наблюдения отмечено нарастание среднего уровня sIgA с 192,3±44,2 до 453,3±90,5 мкг/мл (p<0,05) с последующим постепенным снижением до исходных значений. В группе сравнения среднее содержание sIgA в аналогичные сроки исследования существенно не менялось и регистрировалось на уровне исходных значений.

У 6 (20%) детей I группы с низким содержанием sIgA он значительно нарастал начиная с 5-10 дня приема Имудона и в течение 3 месяцев постепенно снижался. В этой же группе детей при исходно нормальном показателе sIgA не отмечено его изменений. При исходно высоком значении sIgA выявлено его снижение до нормальных значений через 3 месяца от начала терапии (табл. 2).

Таблица 2

Динамика уровня sIgA в слюне пациентов с солидными новообразованиями

в зависимости от исходных значений

Группы наблю-

дения

Исходные уровени sIgA по отношению к N (70–250 мкг/мл)

Уровни sIgA(мкг/мл) в установленные сроки исследования

Исходное значение

Через

5-10 дней

Через

1 месяц

Через

3 месяца

I

низкие

(n=6)

10,4±10,4

496,7±162,4*

493,8±138*

333,9±93,7*

нормальные (n=8)

158,7±18,6

246,5±90,2

165,2±39,96

119,5±51,3

Высокие

(n=6)

419,2±82,7

651,1±193,7

345±124,96

101,3±66,5*

II

низкие

(n=1)

0

0

290,0

250,0

нормальные (n=7)

176,8±16,6

329,3±82,4

255,6±43,5

283,3±60,1

высокие

(n=8)

450±39,7

181,7±50,9**

222,2±49,8**

196,2±48,5**

Примечание: N- норма

* p < 0,05 - различие по отношению к исходному уровню;

**p < 0,01 - различие по отношению к исходному уровню.

Исходно нормальный уровень sIgA в слюне определялся у 7 (43,8%) пациентов II группы и в динамике он не изменялся. У 8 детей с исходно высоким уровнем sIgA слюны на 5 день проведения ПХТ было выявлено его снижение, которое сохранялось спустя 1 и 3 месяца наблюдения (p < 0,05).

Исследование динамики саливарных IgA и sIgA у детей с солидными новообразованиями на фоне ПХТ выявило нормализацию их уровней в группе пациентов, получавших Имудон, и сохранение их нормальных значений в течение 3 месяцев.
  1   2   3

Добавить документ в свой блог или на сайт

Похожие:

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconЗаболевания слизистой оболочки полости рта
Материалом для подготовки этого издания послужили более чем 40 летние клинические наблюдения его авторов, их биохимические, цитологические...

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconГигиена полости рта!
Гигиена полости рта имеет огромное значение в профилактике стоматологических заболеваний у детей. Профилактические мероприятия проводятся...

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconУрока: Образовательные
«естественный иммунитет» и «искусственный иммунитет»; сформировать понятие о группах крови и правилах переливания крови

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconЛекция 4 тема: Биоценозы и биогеоценозы (основы синэкологии)
В природе популяции разных видов объединяются в системы более высокого ранга-сообщества. Наименьшей единицей, к которой может быть...

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconПсихологические особенности детей 4-5 лет
У детей на данном этапе сохраняется непроизвольность психических процессов. Важнейшими новообразованиями являются: завершение процесса...

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconТемы вашего учебного проекта
Актуальность проекта в том, что у детей часто встречаются различные заболевания зубов, которое связано с недостатком информации о...

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconИммунитет, его функциональный характер
Иммунитеты и привилегии административно-технического и обслуживающего персонала консульств

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями icon10. Литература Введение
Иммунитет невосприимчивость организма к инфекционному началу или какому-либо инородному веществу

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconПолезным привычкам – да, вредным нет !
Формирование у учащихся понятия о необходимости регулярного и правильного ухода за зубами, знакомство с основными правилами гигиены...

Мукозальный иммунитет и биоценоз слизистой ротовой полости у детей с солидными новообразованиями iconОт составителя
«иммунитет» души, но и охраняют тело от преждевременного разрушения. Лучше пострадать самому, чем стать причиной страдания других...



Образовательный материал



При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
www.lit-yaz.ru
главная страница